Музеј се налази се у историјском здању некадашње Велике школе, коју је као Лицеј отворио 1808. године велики српски просветитељ и први српски министар просвете Доситеј Обрадовић. Скромна Доситејева заоставштина са личним ствари, библиотеком и рукописима смештени су у приземљу.

Вукову заоставштину откупила је својевремено српска држава од његове кћери Мине Вукомановић. Пренесени су сви Вукови лични и породични предмети из Народног музеја, као и део заоставштине из Српске академије наука и уметности - дипломе, посетнице, разне забелешке, рачуни и рецепти.